GB/T38477-2020基因表达的测定 蛋白印迹法

GB/T 38477-2020.Determination of gene expression-Western blot.
1范围
GB/T 38477规定了用蛋白印迹( Western blot)法测定基因表达的方法原理、试剂或材料、仪器设备、测定步骤和结果分析。
GB/T 38477适用于动植物组织或体外培养细胞目的基因表达测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
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3术语、定义和缩略语
3.1 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1.1
基因表达 gene expression
将储存在DNA分子中的遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子的过程。
3.2缩略语
下列缩略语适用于本文件。
BSA:牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin)
ECL:增强型化学发光( Enhanced Chemiluminescence)
SDS:十二烷基硫酸钠( Sodium Dodecyl Sulfate)
SDS-PAGE:十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
TBS: Tris缓冲盐溶液( Tris Buffered Saline)
TBST :吐温-20/ Tris缓冲盐溶液(Tween-20/ Tris Buffered Saline)
4.原理
SDS-PAGE分离的蛋白质转移到转印膜上后，先用抗目的蛋白质的一抗与转印膜上的蛋白质反应,然后利用带标记的二抗与一抗反应,最后根据二抗标记物的特性,检测微量蛋白质。
本标准规定了用蛋白印迹（Western blot）法测定基因表达的方法原理、试剂或材料、仪器设备、测定步骤及结果分析。 本标准适用于动植物组织或体外培养细胞目的基因表达测定。